病理及特殊染色可开展:
HE染色
免疫组化,免疫荧光实验服务
Tunel(原位末端凋亡法)技术服务
激光共聚焦
电镜:扫描电镜、透射电镜
其他病理实验
实验样本说明:
组织样本 | ||
石蜡切片 | 取材要求 | 1)组织固定越新鲜越好,组织离体后,需及时固定。原则上动物死亡后15分钟内完成取材并及时固定组织。 2)组织标本不宜过大。由于所有的固定液都具有穿透力不强、侵透度不大等特点,凡是需要固定的组织,都不应太大太厚。 |
固定要求 | 1)固定液的选择:10%福尔马林(4%甲醛)或10%中性甲醛是病理切片常规使用的固定液,可以兼顾常规染色和免疫组织化学。 2)固定液的用量:一般加入固定液的量与组织体积比为10:1~20:1。 3)组织固定:固定时间不宜太短,也不宜太长。固定时间太短,会影响组织固定的效果;时间太长,福尔马林会形成聚甲醛,影响核的染色。固定时间主要根据材料块的大小及松密程度以及固定液的穿透速度而定,可以从1小时至数天,通常为数小时至24小时。 | |
切片保存 | 做好的切片,经60℃烤片3-5小时后,可存放于4℃保存;若存放时间较长,最好存于-20℃。 | |
冰冻切片 | 取材要求 | 对于将要做冰冻切片的组织,取材后需立即置于超低温冰箱或液氮中保存. |
固定要求 | 样本冰冻切片后,应立即将切片放入甲醇、95%酒精、丙酮、4%多聚甲醛等固定液中固定 | |
切片保存 | 固定好的切片,自然风干,密封好可置于-80℃、-20℃保存,但最好尽快用于后续实验。 | |
细胞样本 | ||
细胞块石蜡切片 | 对于一些细胞量较多的样品,可离心分离所需细胞,用中性甲醛固定后,制作成琼脂细胞块。然后按照制作石蜡切片的操作流程进行切片。 | |
细胞爬片 | 在孔板里做的细胞爬片,爬片取出后,用PBS洗涤2次,用4%多聚甲醛4℃固定15分钟,将表面液体吹干,置于-20℃保存。若短时间内开展实验,可在加固定液后,于4℃冰箱中放置一段时间。 根据研究目的,PBS洗涤可选择不做,如检测凋亡的TUNEL染色时就需避免洗涤,因凋亡的细胞在洗涤过程中有可能脱落。 mRNA原位杂交:经4%多聚甲醛固定,固定液需用DEPC水配制。 | |
细胞涂片 | 细胞学涂片常用的固定液有95%酒精、酒精-冰醋酸液、乙醚-酒精液和Carney’s液等,其中95%酒精较为常用。 |